PCR实验室的设计与施工

平面布局

某医院PCR实验室平面布局，整个区域有一个公用走廊，每个单独实验区设置有专门的缓冲区。通过压差控制，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染，并且降低扩增产物对人员和环境的污染。

压力梯度控制

试剂准备区和标本制备区呈相对正压状态，以防止外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染。

核酸扩增室及产物分析区应呈相对负压状态，以防止含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品。建议采用5~10Pa压差，在控制上比较容易实现。

正负压区域缓冲室的设置

根据压力梯度的要求，试剂配制室和样品处理室为相对正压，扩增室和产物分析室为相对负压，要求正压的区域和要求负压的区域的缓冲室内的压力设计大不相同。

正压缓冲室符合一般正压洁净室的缓冲原则，主要是防止室外环境空气中的气溶胶进入室内。

PCR实验室内主要设备及房间面积要求

在PCR实验室内有大量的实验仪器，其中一些仪器和实验室建造有很大关系。

试剂准备区

试剂准备区配备有2~8℃冰箱和-80℃冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。房间的面积宜控制在15~20㎡。

标本制备区

标本制备区配备有2~8℃冰箱和-20℃冰箱，计算冷负荷时，需要将它们计算在内。在标本制备区，还需要配备生物安全柜，用于进行提取核酸的操作。为避免提取的核酸在柜内反复循环，造成标本之间的交叉污染，出现假阳性结果，该区域配备的生物安全柜是B2型的。生物安全柜工作区垂直气流来自实验室，排风经过过滤器过滤后直接排至室外，不允许回到安全柜和实验室中。

根据我们的经验，如果实验室内配备生物安全柜，每配备一台，实验室的面积增加10㎡；标本制备区的面积宜在25~30㎡之间。

扩增室

扩增室主要配备PCR实验室的核心仪器PCR仪，本文实例中使用了ABI7500和ABI9700两种PCR仪。在实验室建造过程中，需要给PCR仪配备专门的UPS电源，保障它的正常工作。该区面积控制在15~20㎡。

产物分析区

在室内配备通风橱，保障房间内的相对负压，空气从室外流向室内。该区面积控制在15~20㎡。

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